在细胞培养实验中,作为细胞培养的主力军,培养基是细胞培养的基础,它提供了细胞所需的营养物质、生长因子以及适当的环境条件。还有另一种用于支持微生物生长和繁殖的营养的培养基,就是微生物培养基。
微生物培养基的故事始于16世纪末,简易的显微镜在荷兰诞生,这为人类与微生物的相识创造了条件。17世纪80年代,列文虎克用自制显微镜观察了多种物质,发现了许多“活的小动物”,从此打开了人类对微生物研究的大门。常见的有血琼脂平板培养基、巧克力琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基(MAC)等。
血平板血平板作为常用的细菌培养基,广泛应用于细菌的分离、培养和特性鉴定。其主要成分包括脱纤维羊血或兔血、普通营养琼脂(如哥伦比亚琼脂),以及一些营养物质如酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物等。主要用途有以下几种:
细菌培养:血平板适用于各类细菌的生长,特别是需要较高营养条件的细菌。
溶血试验:血平板常用于观察细菌的溶血特性,例如链球菌的α、β溶血现象。
抗生素敏感性测试:血平板可用于检测细菌对抗生素的敏感性。
巧琼脂培巧克力琼脂培养基是一种用于分离和培养嗜酸菌和嗜血杆菌的非选择性培养基,是通过加热至80°C使红细胞破裂并释放其内容物,赋予培养基巧克力棕色,并富含对某些细菌生长至关重要的血红蛋白、血素(X因子)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD或V因子)。制备原料有牛肉浸出液、蛋白胨、氯化钠、琼脂、无菌脱纤维马血、羊血或兔血等。
在临床微生物实验中一般用于分离和鉴定导致严重感染的人类细菌,以及进行这些细菌的质量控制和敏感性测试。巧克力琼脂培养基可能允许正常菌群或污染物过度生长,影响目标细菌的分离。因此,在使用时需结合其他生化和/或血清学测试来确认微生物的身份及其对抗生素的敏感性。
麦康凯琼脂培养基(MAC)
麦康凯琼脂培养基(MacConkey Agar,简称MAC)是一种选择性培养基,主要用于分离和鉴别革兰氏阴性杆菌,特别是肠杆菌科细菌,如大肠埃希菌、沙门氏菌和志贺氏菌等。其主要成分包括牛肉蛋白胨、乳糖、胆盐、氯化钠、中性红、结晶紫和琼脂。
制备时将牛肉蛋白胨、乳糖、胆盐、氯化钠、中性红、结晶紫和琼脂等成分按比例混合,加入蒸馏水溶解。加热煮沸后,调节pH至7.2±0.2(25℃)。在121℃下高压灭菌15分钟。冷却至45-50℃后,倾注平板备用。主要用途有以下几种:
食品检测:用于食品中肠道致病菌的分离和鉴定。
临床检验:用于粪便样本中肠道杆菌的分离和鉴定。
化妆品和药品检测:用于检测化妆品和药品中的肠道致病菌。
我国在20世纪50年代末开始研制干燥培养基,近年来我国培养基事业近年来有了飞速发展,大大缩短了与发达国家的差距。商品培养基正逐步被微生物学工作者所接受,微生物培养基在微生物学研究、医学诊断、环境监测、食品工业、药物研发和基因工程等领域均有着重要的应用。