高效液相色谱仪检测 大豆黄卷 含量

（新增品种）

Dadou Huangjuan

SEMEN SOJAE GERMINATUM

本品为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的成熟种子发芽干燥而得。大豆用水浸泡至膨胀，将水放出，用湿布覆盖，每日用清水冲洗一次或喷淋二次，待芽长至0.5cm～1cm时，取出，干燥。

【性状】 本品略呈肾形，长约8mm，宽约6mm。表面黄色或黄棕色，微皱缩，一侧有明显的脐点，一端有1弯曲胚根。外皮质脆，多破裂或脱落。子叶2片，黄色。气微，味淡，嚼之有豆腥味。以粒大、饱满者为佳。

【鉴别】 (1)取本品粉末1g，加稀乙醇30ml，超声处理30分钟，离心（3000转/分钟）10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇1ml使溶解，取上清液，作为供试品溶液。另取亮氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml 含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水（19：5：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（2）取本品粉末2g，加80%乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加80%乙醇1ml使溶解，取上清液，作为供试品溶液。另取染料木苷对照品，加80%乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（10：1.7：1.3）为展开剂，展开缸中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检查】水分 不得过11.0%（附录Ⅸ H）。

总灰分 不得过7.0％（附录Ⅸ K）

【含量测定】 照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以1%醋酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为260nm。理论板数按大豆苷、染料木苷峰计算均不得低于5000。

对照品溶液的制备 取大豆苷、染料木苷对照品各约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备 取本品粉末（过四号筛）约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心（2000转/分钟）10分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含大豆苷（C₂₁H₂₀O₉）和染料木苷（C₂₁H₂₀O₁₀）的总量不得少于0.08%。

【炮制】 取灯心草、淡竹叶置锅内，加入适量水煎煮二次，第一次60分钟，第二次30分钟，合并煎液，滤过。滤液与大豆黄卷共置锅内，煮至药液被吸尽，取出，干燥。

每100kg净药材用灯心草1kg、淡竹叶2kg。