Anti-Myc MagBeads（Anti-Myc免疫磁珠）
产品名称： Anti-Myc MagBeads（Anti-Myc免疫磁珠）
英文名称： Anti-Myc MagBeads（Anti-Myc免疫磁珠）
产品编号： 20567ES76
产品价格： 1248.00
产品产地： Yeasen
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2024-12-27T14:45:05
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 500 µl | 1248.0 |
| 1 mL | 2258.0 |
| 5 mL | 8698.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
Anti-Myc免疫磁珠（Anti-Myc MagBeads）是一种聚合物磁性微球，由高质量的鼠源抗Myc单克隆抗体与粒径为200 nm的硅基磁珠通过共价偶联制备，本产品具有快速的磁响应性，超顺磁性、良好的分散性、粒径均一、极低的非特异结合和丰富的结合位点等特点，可用于带有Myc标签的蛋白免疫沉淀（IP）或免疫共沉淀（Co-IP）。
产品性质
|
基质（Matrix spherical） |
硅基磁珠 |
|
配体（Ligand） |
Anti-Myc Antibody |
|
结合能力（Binding Capacity） |
≥0.5 mg Myc标签融合蛋白/mL磁珠 |
|
粒径（Particle size） |
200 nm |
|
磁珠浓度（Concentration） |
10 mg/mL |
|
储存缓冲液（Storage Buffer） |
PBS, 0.01% Tween-20, 0.02% NaN3 |
|
应用（Application） |
IP、Co-IP等 |
储存条件
2~8℃保存，有效期1年。避免冻存！
使用说明
以免疫沉淀（IP）为例，步骤如下：
- 缓冲液配制
【注】建议以下缓冲液在使用前用 0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜过滤。
裂解缓冲液：0.15 M NaCl, 50 mM Tris-HCl, 1% NP-40, pH7.4或WB/IP裂解液（Cat#20118ES）
平衡/结合/洗杂缓冲液：0.15 M NaCl, 20 mM Na2HPO4, pH7.0
洗脱缓冲液：0.1 M甘氨酸，pH 3.0
中和缓冲液：1 M Tris-HCl，pH 8.5
- 样品准备
本操作说明书提供以下四种样品处理方法，建议您根据不同来源的样品选择适当的方式进行预处理，使待检测蛋白释放至样品溶液中。
血清样品处理：若目标蛋白丰度较高， 建议用结合缓冲液稀释血清样品至目标蛋白终浓度为10-100 µg/mL，置于冰上备用(或置于-20℃长期保存)。
悬浮细胞样品处理：离心收集细胞（4℃, 1000g, 5 min），用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250 μL裂解液的比例加入含蛋白酶抑制剂的裂解液（裂解液应在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM）。混匀后置于冰上处理10 min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10 min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。
贴壁细胞样品处理：移去培养基，用PBS清洗细胞两遍；用细胞刮棒刮脱细胞，收集至1.5mL EP管内，按照6孔板每孔加入150-250 μL裂解液的比例加入含蛋白酶抑制剂的裂解液（裂解液应在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1 mM）。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。混匀后置于冰上处理10 min；离心收集上清液（4℃, 14000g, 10 min），置于冰上备用（或置于-20℃长期保存）。
- 磁珠预处理
3.1用移液器轻柔吹打Anti-Myc免疫磁珠，使其充分混悬，取25~50 µL 磁珠悬液置于1.5 mL离心管中。
3.2加入500 µL IP Lysis/Wash Buffer并轻轻移液器混合，用移液器轻柔吹打重悬Anti-Myc免疫磁珠，放置在磁分离器上，待溶液变澄清后，用移液器吸弃上清。重复洗2次。
4. 样品的结合
4.1在预处理后的磁珠中加入含有Myc标签的蛋白样品，置于翻转混合仪上孵育(常温1~2 h，或4℃过夜)；
4.2将上述混合液置于磁力架上静置，大约1 min，待溶液变澄清后，把上清液转移到新的离心管中备用(上清液可用于检测Myc标签蛋白是否存在残留)，原离心管中剩余的即为蛋白-磁珠复合物；
注意：结合过程中，磁珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象，不会影响实验结果。
5. 洗涤
5.1向上述步骤4.2所得的蛋白-磁珠复合物中加入1000 µL IP Lysis/Wash Buffer，轻柔混匀磁珠5~10 min，接着在磁力架上静置，大约1 min，待溶液变澄清后后, 吸弃上清；
5.2重复步骤5.1两次，直至洗涤后的上清液OD280小于0.05为止；
注意：如上清液的OD280仍大于0.05，则适当增加洗涤次数。
- 蛋白洗脱
根据下游用途选择洗脱方法。
6.1 Myc融合蛋白洗脱
1）配制Myc多肽洗脱液：TBS中溶解Myc多肽，终浓度为0.2-1 mg/mL。
2）分别加入100 μL HA多肽洗脱液，4℃孵育 2 h-6 h（慢慢摇晃）
3）分离磁珠上的磁珠并保存含有目标抗原的上清液。
4）重复洗脱步骤一次以获得更高的回收率
6.2 酸性洗脱（0.1 M Gly-HCl，pH 3.0）
1）加入100 μL 0.1 M Gly-HCl，pH 3.0，室温孵育5-10 min（慢慢摇晃）。
2）分离磁珠上的磁珠并保存含有目标抗原的上清液。
3）中和低pH，每100 μL洗脱液加入20 μL中和缓冲液(1 M Tris-HCl，pH 8.5)。
6.3 用SDS-PAGE上样缓冲液洗脱
如需直接检测目的蛋白，则在上述洗涤过的蛋白-磁珠复合物中加入80~100 μL 1×SDS-PAGE上样缓冲液，煮沸 10 min，冷却至室温并在磁力架上分离磁珠，取上清进行 SDS-PAGE 检测。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20240801