精品│翌圣ZymeEditor打造超高文库转化率T4 DNA Ligase
建库作为NGS测序的核心步骤，直接影响测序质量，文库转化率是评估文库质量的重要指标，高的文库转化率一定程度上意味着文库丰富度、测序数据均一性更好。常规T4 DNA Ligase催化DNA的 3’-OH 和接头的5’-磷酸基团之间形成磷酸二酯键完成接头连接，但此过程中会出现片段自连，从而减低文库转化率，影响文库丰富度与测序质量。翌圣ZymeEditor™酶改造平台对T4 DNA Ligase进行定向改造获得Hieff® 5' App T4 DNA Ligase（Cat#14960ES），该突变体只能以预苷化接头为底物进行接头连接，显著减少片段自连，提高文库转化率。
图1. NGS常规建库流程
产品特点
1、极低片段自连：只能以预腺苷化的接头为底物，极大降低片段自连。
2、超高接头连接效率：连接效率达95%以上。
3、严格质控：无切口酶、外切酶及RNase残留。
数据展示
图2. 以170 bp模式片段为底物连接效率检测
图3. 以300 bp模式片段为底物连接效率检测
图4. RNase残留检测 C：阴性对照
3、无切口酶及外切酶残留
将200 U Hieff® 5' App T4 DNA ligase与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣Hieff® 5' App T4 DNA ligase无切口酶残留。
图5. 切口酶残留检测 C：阴性对照
将2000 U Hieff® 5' App T4 DNA ligase与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示翌圣Hieff® 5' App T4 DNA ligase无外切酶残留。
图6. 外切酶残留检测 C：阴性对照
相关产品推荐
|
产品定位 |
产品名称 |
产品货号 |
|
末修加A |
UCF.ME® T4 DNA Polymerase (3 U/μL) |
14457ES |
|
T4 Polynucleotide kinase(10 U/μL) |
12902ES |
|
|
常规接头连接 |
Hieff® Quick T4 DNA Ligase |
10301ES |
|
预腺苷化接头连接 |
Hieff® 5' App T4 DNA ligase |
14960ES |
|
文库扩增 |
地 址： 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元 联系人： 李自转 电 话： 400-6111-883、021-34615995-8075 传 真： 021-34615995-188 Email：lizizhuan@yeasen.com
干货 | 基因编辑探秘系列之产品选购指南
(2024-12-26T00:00 浏览数:6873)
精品推荐 | 这款酶在多重PCR扩增体系里表现极佳！
(2024-12-24T00:00 浏览数:11722)
上新 | 做克隆，更省心！
(2024-12-24T00:00 浏览数:11352)
试用！GMP级细胞因子重组人IL-3和人bFGF重磅上市！
(2024-12-24T00:00 浏览数:11825)
UCF.ME® rTEV蛋白酶：无残留精准切除蛋白标签的高效解决方案
(2024-12-24T00:00 浏览数:7966)
宿主gDNA、试剂背景核酸污染去除只需一款Thermolabile dsDNase！
(2024-12-20T00:00 浏览数:8758)
IVD冻干RDC，为分子诊断“量身定制”、领先“翌”步！
(2024-12-20T00:00 浏览数:12215)
看到就是赚到！mRNA药物研发及生产流程的质量安全控制策略全公开！
(2024-12-20T00:00 浏览数:9651)
巨噬细胞清除小课堂 | 第二课：肝脏
(2024-12-20T00:00 浏览数:13567)
干货 | 收藏夹吃灰系列之克隆典型案例分析
(2024-12-20T00:00 浏览数:5540) |